凍存管主要由保存液、保存管和小瓷珠三部分組成,它是一種實驗室保存菌種的容器,用于菌種的保存或者轉移,一般菌種保存管內(nèi)有25顆小瓷珠用于細菌的吸附和保存。
使用過程中,將細菌接種在保存管內(nèi),放置于-20℃或-80℃環(huán)境中可長期保存。(-20℃可保存一年,-80℃可保存兩年)。細菌菌株的保存始終是實驗室一個*的工作。長期以來,形成了平板傳代法、斜面?zhèn)鞔?、凍干法等多種。
保存方法:隨著可保存時間的由短到長,保存復雜程度及對相應設備的要求也是逐步增加。如何取得可保存時間與保存復雜程度之間的關系,是菌種保存方法的關鍵。
凍存管操作步驟:
1、直接刮取平皿上生長的新鮮培養(yǎng)物置入菌種保存管中;
2、一般一個平皿的純培養(yǎng)物可保存兩個菌種保存管;
3、使用時用接種針從菌種保存管中取出一個小瓷珠直接劃線平板或置入相應增菌液中。
滅菌與保存:
菌種保存管整體由r射線滅菌,在使用前可室溫存放。在未經(jīng)使用前,可存放1年。
注意事項:
從原理上講,所有菌種都可用凍存管保存。菌種保存的原理是DNA復制時自發(fā)突變導致菌種退化,因此要創(chuàng)造代謝不活潑的狀態(tài),干燥、低溫、缺氧、缺營養(yǎng)的環(huán)境,創(chuàng)造的環(huán)境越接近此狀態(tài),所保存的菌種的時間就越長。
但需要注意的是,由于苛刻菌(如流感嗜血桿菌、腦膜炎萘瑟氏菌)等特殊細菌保存時,需-80℃或更低溫度保存,才可以做到更長期的保存。